A transdução lentiviral é uma Plataforma de entrega popular Para aplicações como engenharia de células CAR-T ou edição de genes CRISPR-CAS9, pois pode transduzir células divisórias e não divididas e acomodar grandes cargas úteis.1 No entanto, aprender a trabalhar com lentivírus pode ser complicado. Os pesquisadores podem “gastar tempo significativo solucionando e otimizando cada etapa do processo – derrotando meses de trabalho e recursos de laboratório”, disse Thomas Quinn, um virologista que trabalha para a Takara Bio.
No protocolo de transdução lentiviral padrão, as células ficam na parte inferior de um poço, enquanto o vírus contendo carga útil está em solução no topo. Nesta configuração, a maioria do vírus nunca entra em contato com as células. As tentativas de aumentar o contato com células vírus usando centrifugação mecânica (spinoculação) ou aprimoramento químico oferecem apenas ganhos limitados em eficiência e podem exercer efeitos a jusante imprevisível nas células.
Os poros de uma esponja fornecem espaço para interações mais próximas entre as células e as partículas de lentivírus, aumentando a eficácia da transdução.
Takara Bio
Por outro lado, a microfluídica coloca células e vírus juntos em espaços estreitos para aumentar a eficiência da transdução. Infelizmente, essas abordagens exigem equipamentos especializados caros. Considerando isso, Quinn e seus colegas da Takara Bio desenvolveram o Esponja de transdução LENTI-X ™uma esponja de alginato que imita as abordagens microfluídicas por co-localizar células e vírus dentro de seus poros de 20 a 300 µm. A esponja é fácil de usar: basta adicionar células e vírus, incubar por 24 horas e eluir com tampão para liberar células saudáveis e transduzidas prontas para uso a jusante.
Quinn postulou que a maior vantagem da esponja de transdução Lenti-X ™ é sua flexibilidade e acessibilidade. A esponja é agnóstica do tipo celular e de partículas e funciona com células difíceis de transdução, incluindo células-tronco hematopoiéticas, células assassinas naturais e células T, além de outros tipos virais, como retrovírus e adenovírus. “Qualquer pesquisador, seja um estudante de graduação novinho em folha ou um especialista experiente em lentivírus, pode obter transduções bem-sucedidas usando microfluídicas”, disse Quinn.
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